蛋白酶K 是一种切割活性较广的蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH 范围内(pH4-12.5) 均有活性，在尿素和SDS 中也较为稳定，还具有降解天然蛋白质的能力。

蛋白酶K 是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从林伯氏白色念球菌（tirtirachium album limber） 中纯化得到，用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个Ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去Ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。