技术文章
Technical articles组织样本是生物医学研究中使用频率很高的一种样本,而从组织中提取高质量的RNA对于许多实验的成功至关重要。以下的预处理注意事项,能够帮助您最大限度地提高组织样本中RNA的质量。
缩短冷缺血时间
冷缺血时间是指组织离体后到储存前的时间间隔。这段时间越短,RNA降解的风险就越低。因此,应尽可能快速地将组织样本转移到低温环境中保存。
选择合适的保存方式
低温保存虽然能够有效保持RNA的完整性,但在冷冻和解冻过程中可能会对组织造成机械损伤。为了减轻这种影响,可以在保存过程中添加保护剂,如二甲基亚砜(DMSO)、甘油等,以减少冰晶的形成。
二甲基亚砜(DMSO)结构式
减少冻融循环
反复冻融组织会导致RNA降解加剧。因此,尽量减少组织样本的冻融次数,并在每次使用后重新冷冻剩余的样本。
固定方法的选择
不同的固定方法会影响组织样本中RNA的完整性。例如,石蜡包埋虽然是一种常用的固定方法,但其提取的RNA含量较低,更适合定量PCR分析。
组织石蜡切片
遵循上述组织预处理注意事项,可以帮助研究人员获得更加可靠的组织RNA样本,从而支持高质量的科学研究。