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全血、血清、血浆样本在DNA提取过程中的区别

更新时间:2024-08-28点击次数:156

在核酸提取中,很多的血液类DNA提取试剂盒对于全血、血浆、血清均可使用,所以有些人认为这三种样本可以随意选择试剂盒来进行核酸检测,但是得到的结果却达不到预期,那么这三种样本有什么区别,对核酸诊断实验有什么影响呢?

血浆包括血清和纤维蛋白原。血清与血浆从表面上看似乎没有什么不同,血浆是未经抗凝处理过的血液凝固后得到的。血液的抗凝处理需要抗凝剂,选用什么抗凝剂应根据具体的实验要求进行选择。血液由液体成分血浆和有形成分血细胞两部分组成,而血清是血凝后析出的淡黄色澄清液体,较之血浆少了某些凝血因子和纤维蛋白原。

全血、血清、血浆样本在DNA提取过程中的区别


从核酸诊断的角度来讲,人的基因组DNA更多的存在于白细胞中,而只有少量游离DNA存在于血清中,但如果白细胞大量凋亡,血清中的游离DNA量会有所增加。而具有致病性的病原体核酸大量存在于血清中,几乎不存在于血细胞中。

所以,如果是以人的核酸为检验目标,如筛查白化病,筛查血友病等,应该以全血作为实验样本,因为血清和血浆中所含有的人的核酸数量远远少于全血,检测灵敏度会降低很多。

而如果是以病原体核酸为检验目标,如检测乙肝感染情况,检测感冒病毒等,则以血清或血浆为实验样本,这会天然地剔除血细胞这种杂质,明显降低核酸提取过程中的难度,有利于提高核酸纯净度,增加检测反应灵敏性和稳定性。

而血清和血浆相比,一方面血清中含有更少的纤维蛋白原,一方面血清中的DNA是循环DNA,主要来源于病变组织,所以使用血清作为实验样本,可以更进一步提高样本纯净度,减少蛋白杂质,提高病原体浓度,获得更为灵敏的检测结果。

对于试剂盒而言,在相同体系下,样本杂质越少,DNA的提取质量就越高。因此要通过实验目的和实验材料来慎重选择试剂盒。